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脳・神経組織の分散

抗体結合を伴う多くのアプリケーションでは、エピトープの完全性を保持したまま、単細胞懸濁液を調製する必要があります。専用の酵素キットと信頼の組織分散・破砕装置により、脳・神経組織から効率よくマイルドに神経系細胞を調製できます。

≤ P7 脳・神経組織の分散

細胞表面エピトープの保存に適した酵素
≤ P7 脳・神経組織の分散
トリプシンベースのキット:NTDK(T)もしくはパパインベースのキット:NTDK(P)により分散後、Anti-GLAST-PEで染色しフローサイトメトリー解析を行った。トリプシンベースの分散ではAnti-GLAST抗体のエピトープが保存されているが、パパインベースの分散ではエピトープが消化されていることが示された。

Neural Tissue Dissociation Kit (T)
Neural Tissue Dissociation Kit (P)
Neural Tissue Dissociation Kit (PN)

脳・神経組織をマイルドに効率良く分散するために開発された酵素キットです。パパインベース(P)、トリプシンベース(T)、生後ニューロンを目的細胞とする場合(PN:Postnatal Neurons)の3種類をご用意しています。
2ステップの酵素処理により、viabilityよく単細胞懸濁液を調製でき、さらに、gentleMACSシリーズと組み合わせることで、より再現性よく簡便に多数の生細胞を得ることが出来ます。

> P7 脳・神経組織の分散

成体脳から単細胞懸濁液の調製
> P7 脳・神経組織の分散
成体脳を分散直後は、大量のデブリ(A)および赤血球(B)が混在しており、その後の細胞分離、培養ならびに解析に影響します。Adult Brain Dissociation Kitで分散後に細胞デブリ(C)およ び赤血球(D)を取り除くことで、最適な状態の単細胞懸濁液を調製できます。

Adult Brain Dissociation Kit, mouse, rat

gentleMACS Octo Dissociator with Heatersと組み合わせることで、成体マウスおよびラット脳組織から単細胞懸濁液を調製できます。キットには、パパインベースの分散試薬の他、赤血球除去用試薬、ミエリン片などを除くためのデブリ除去用試薬が含まれます。分散後は、培養をはじめMACSテクノロジーによるニューロン、アストロサイト、オリゴデンドロサイト、内皮細胞等の分離が可能です。

※ ミクログリアを分離する場合は、Neural Tissue Dissociation Kitsによる分散をお勧めします。

脳腫瘍の分散

Brain Tumor Dissociation Kit (P)
Brain Tumor Dissociation Kit (T)

ヒト脳腫瘍から単細胞懸濁液をマイルドに再現性よく調製するために開発されました。gentleMACSシリーズと組み合わせることで、より再現性よく簡便に多数の生細胞を得ることが出来ます。

ミエリン片の除去

P22マウス脳分散後の効果的なミエリン片の除去例
ミエリン片の除去

Myelin Removal Beads II, human, mouse, rat (4mL)
Myelin Removal Beads II, human, mouse, rat (2x4mL)

P>7げっ歯類あるいはヒトの脳・神経組織を分散すると、大量のミエリン片が生じます。ミエリン片の除去により、神経細胞分離や免疫染色および細胞培養の効率を改善できます。

Adult Brain Dissociation Kitsを使用する場合は、 本試薬は必要ありません。

主要マーカーのトリプシン・パパイン耐性

*1 : パパインに対して若干の感受性があります。
*2 : トリプシンに対して若干の感受性があります。
※ AN2(NG2), h,mは、パパイン、トリプシンに対して感受性がありますが、分散後37˚Cで3時間程培養することで抗原が再発現します。

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Miltenyi Biotec K.K.
TEL +81 3 5646 8910
FAX+81 3 5646 8911
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