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Mouse B cell Research Products
近年、自己免疫疾患やその他炎症性疾患の病態解析において、B細胞の新たなファンクションやサブセットの研究が盛んになってまいりました。ミルテニーバイオテク社の豊富なマウスB細胞研究用試薬および参考論文をご紹介します。
 

◆マウスB細胞分離試薬新製品案内
130-095-873　Regulatory B cell アイソレーションキット(マウス)
自己免疫疾患の研究において近年注目されるIL-10分泌B細胞、Regulatory B細胞を、Cytokine Secretion Assay (CSA) の技術を用いて生きたまま濃縮する画期的なキットです。B細胞はB細胞レセプター (BCR) と CD40 を介して活性化すると IL-6 やTFN-α などを分泌しますが、CD40 のみの刺激で活性化した場合、免疫反応を抑制する作用のあるIL-10を分泌することが知られています。

＜原理＞ 
1. B細胞のプレ濃縮：B細胞以外を磁気標識して除去
2. B細胞を刺激し、IL-10を産生させる
3. 抗IL-10抗体と抗CD45抗体の融合抗体(Catch-Reagent)でB細胞を標識
4. 分泌されたIL-10をCatch-Reagentで補足
5. 抗IL-10-PE抗体でCatch-Reagent上のIL-10を標識
6. Anti-PE MicroBeadsで磁気標識、濃縮
◆CSAとは
CSAは、抗CD45抗体と抗サイトカイン抗体から成るCatch Reagentで分泌されるサイトカインをキャッチし、次にサンドウィッチ法により蛍光標識してサイトカイン産生細胞を検出します。さらに、マイクロビーズで磁気標識してサイトカイン産生細胞を“生きたまま”濃縮・分離することも可能です。
 
  ＜IL-10産生B細胞の濃縮＞
 

130-095-813　Pan B cell アイソレーションキット(マウス) 
Non-B細胞のディプリーションにより、ビーズ非標識のB-1およびB-2B細胞の分離を行うためのキットです。当キットの抗体カクテルには、抗CD43および抗CD11b抗体は含まれていないため、B-CLLモデルマウスなど、様々な疾患モデルマウスからB細胞の分離が可能です。
 
Coming Soon! Memory B cell アイソレーションキット(マウス)
10種類のビオチン化抗体とStreptavidin MicroBeads の組み合わせで非標識のIgG陽性のMemory B cell (CD45R+/ CD38+/ IgM-/IgG+) を分離するキットです。
 
 

◆その他マウスB 細胞分離用試薬
◆CD19マイクロビーズ(マウス) アプリケーション
1. footprintingによるB細胞分化の過程におけるκ鎖エンハンサーの機能解析 
　　Shaffer et al. (1997) Immunity 6: 131-143.
2. マイクロアレイによるB細胞分化の過程における転写因子の発現解析 
　　Portis and Longnecker (2003) J. Virol. 77: 105-114.
3. ツベルクリン研究におけるB細胞adoptive transfer 
　　Maglione et al. (2007) J. Immunol. 178: 7222-7234.
 
＜例＞　CD19マイクロビーズ(マウス)を用いてマウス脾臓よりB細胞を分離した。分離前後の細胞をCD19-FITC と CD45R(B220)-PE抗体で染色し、フローサイトメーターで解析した。
 
 
◆B cellアイソレーションキット(マウス) アプリケーション
4. Northern blot 法によるトランスジェニックマウスB細胞の導入遺伝子発現解析 
　　Harrow et al. (2005) J. Immunol. 175: 6659-6667.
5. in vivo でのTh2細胞分化におけるB細胞の役割の解析 
　　Liu et al. (2007) J. Immunol. 179: 3821-3830
6. クラススイッチにおける遺伝子組み換えの解析 
　　Janas et al. (2008) J. Immunol. 180: 739-746

◆その他B細胞サブセット分離
7. Anti-FITC, Anti-PE マイクロビーズを用いた、マウス脾臓からのCD23+ Follicular B cell とCD21+/CD23- Marginal zone B cell の分離 
　　Mandik-Nayak et al. (2006) J. Exp. Med. 203: 1985-1998
8. ビオチン化抗IgD抗体とStreptavidinマイクロビーズを用いてマウス骨髄からIgD+ 成熟B細胞の分離 
　　Li et al. (2007) Blood 109: 3839-3848.
 
 
品名　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　 品番
CD5 マイクロビーズ 130-049-301
CD19 マイクロビーズ 130-052-201
CD43 マイクロビーズ　 130-049-801
CD45R(B220) マイクロビーズ　 130-049-501
CD138+ plasma cell アイソレーションキット 130-092-530
B cell アイソレーションキット　 130-090-862
　 　
Rat Anti-Mouse IgG1マイクロビーズ 130-047-102,
130-047-101
Rat Anti-Mouse IgG2a+b マイクロビーズ 130-047-202,
130-047-201
Rat Anti-Mouse IgM マイクロビーズ 130-047-302,
130-047-301
Goat Anti-Mouse IgG マイクロビーズ 130-048-402,
130-048-401
　 　

◆マウスB 細胞解析用抗体
フローサイトメーターでのマウスB細胞分離後の純度確認や細胞表面分子解析に使用できます。
 
品名　　　　　　　　　　　　標識 品番
CD16/32　　　　　　　　　　PE
　　　　　　　　　　　　　　　　　APC
　　　　　　　　　　　　　　　　　Biotin
　　　　　　　　　　　　　　　　　Pure 		130-092-572
130-092-573
130-092-570
130-092-574
CD19　　　　　　　　　　　　FITC
 　　　　　　　　　　　　　　　　　PE
　　　　　　　　　　　　　　　　　APC		 130-092-042
130-092-041
130-092-039
CD25　　　　　　　　　　　　　PE
　　　　　　　　　　　　　　　　　APC
　　　　　　　　　　　　　　　　　Biotin		 130-091-013
130-093-734
130-092-569
CD40　　　　　　　　　　　　　PE
　　　　　　　　　　　　　　　　　APC
　　　　　　　　　　　　　　　　　Biotin
　　　　　　　　　　　　　　　　　Pure (functional grade)		 130-092-848
130-092-847
130-092-846
130-093-023
130-093-022
CD43　　　　　　　　　　　　　PE
　　　　　　　　　　　　　　　　　APC		 130-091-585
130-091-581
CD45　　　　　　　　　　　　　FITC
　　　　　　　　　　　　　　　　　PE
　　　　　　　　　　　　　　　　　APC
　　　　　　　　　　　　　　　　　VioBlue		 130-091-609
130-091-610
130-091-811
130-092-910
CD45R (B220)　　　　　FITC
　　　　　　　　　　　　　　　　　PE
　　　　　　　　　　　　　　　　　APC
　　　　　　　　　　　　　　　　　VioBlue		 130-091-829
130-091-828
130-091-843
130-094-287
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