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MACSelect™ 4 system は、形質転換細胞のセレクションマーカーとして、細胞内ドメインを短縮したヒト CD4分子を用いています。このシステムは、実質上すべての CD4陰性細胞株および初代培養細胞に使用できます*。
pMACSelect 4-IRES.II は、目的遺伝子と短縮CD4遺伝子の両方を同時に発現できるプラスミドです。IRES (internal ribosomal entry site) エレメントにより、目的遺伝子は、セレクションマーカーである CD4 と同じ mRNA から翻訳されます。 pMACS 4.1 vector は短縮した CD4 表面マーカーをコードしており、目的遺伝子を発現するベクターと共に co-transfection して使用します。
MACSelect 4 - Transfected Cell Selection Kit には、ベクター、MACSelect MicroBeads、蛍光標識抗体が含まれており、MSCSelect System のセットアップのためのコントロール用ベクターと抗体が添付されています。各々の試薬は個別に購入することも可能です。
* CD4 はトリプシンに耐性が無いので、トリプシンで回収する細胞株には適しません。 |
| Disclaimer |
| CMV promoter は US patent 5,168,062 及び 5,385,839 によって保護されており、研究目的にのみ許可されています。CMV promoter のその他の使用には、以下の所からのライセンスが必要です。The University of Iowa Research Foundation, 214 Technology Innovation Center, Iowa City, IA 52242 |
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| Figure 1 |
| The pMACS 4-IRES.II vector. |
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| * The BsmB I site is compatible with Hind III digested fragments. |
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| Figure 2 |
| The pMACS 4.1 vector. |
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| Figure 3 |
| Transfection of CHO cells with pMACS 4-IRES.II, magnetic labeling with MACSelect 4 MicroBeads and separation. FITC staining of transfected cells (CD4-FITC/MACSelect Control FITC), blue nuclear counterstain (Toto 3, Molecular Probes). |
| A: Less than 4% transfected cells after transfection |
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| B: More than 90% transfected cells after MACSelect enrichment |
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| Figure 4 |
| MACSelect transfected cell enrichment |
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| 製品 |
| MACSelect 4 キット |
| 保存条件 / 輸送条件 |
- for 25 separations 構成品 - 25 μg pMACS 4-IRES.II - 25 μg pMACS 4.1 - 25 μg pMACS 14.1 - 0.25 mL MACSelect Control FITC Antibody - 0.25 mL CD4-FITC, human - 0.25 mL CD14-FITC, human - 2 mL MACSelect 4 MicroBeads データシートのダウンロード 130-091-988
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| pMACS 4.1 |
| 保存条件 / 輸送条件 |
構成品 - 25 μg plasmid データシートのダウンロード 130-091-886
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| pMACS 4-IRES. II |
| 保存条件 / 輸送条件 |
構成品 - 25 μg plasmid データシートのダウンロード 130-091-888
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| MACSelect 4 マイクロビーズ |
| 保存条件 / 輸送条件 |
- for 25 separations 構成品 - 2 mL MACSelect 4 MicroBeads データシートのダウンロード 130-070-101
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| References |
| 1. David et al. (2005) Stem Cells 23: 477-482. |
| 2. Philipps et al. (2004) BioTechniques 36: 80-83. |
| 3. Szentirmay et al. (2003) J. Biol. Chem. 278: 37231-37240. |
| 4. Kube et al. (1999) J. Virol. 73: 1630-1636. |
| 5. von Knethen et al. (1999) Macrophages. Mol. Biol. Cell 10: 361-372. |
| 6. Gaines et al. (1999) BioTechniques 26: 683-688. |
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