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| CD4+CD25+CD127dim/- Regulatory T Cell アイソレーションキットII |
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| Description |
| CD4+CD25+CD127dim/– Regulatory T Cells Isolation Kit IIは、ヒトPBMCからCD4+CD25+CD127dim/– regulatory T細胞を分離するために開発されました。分離は2ステップで行います。 |
| Details |
Background information CD127はIL-7レセプターのα 鎖であり、ほとんどの成熟T細胞に発現していて、その分化や増殖に重要な役割を担っています。しかしCD127の発現は、制御性T 細胞では認められず、FoxP3 と逆相関の発現パターンとなります。このため、ヒト制御性T細胞と活性化T細胞とを区別するためのマーカーの一つとして、CD127を用いることが出来ます。
Detailed separation procedure CD4+CD25+CD127dim/– regulatory T細胞の分離は、2ステップで行います。まず、ビオチン標識抗体カクテルとAnti-Biotin MicroBeadsにより磁気標識し、non-CD4+ 細胞とCD127high 細胞のディプリーションを行います。次に、フロースルーのCD4+CD127dim/– T細胞の濃縮画分を、CD25 MicroBeadsⅡで磁気標識し、ポジティブセレクションすることによってCD4+CD25+CD127dim/- 制御性T細胞を分離します。 Downstream applications ヒトPBMCからCD4+CD25+CD127dim/– regulatory T細胞を分離して、表現型や機能の解析を行えます。 |
| Columns |
ステップ1のディプリーション: LD 又は autoMACS Columns ステップ2のポジティブセレクション: MS 又は autoMACS Columns |
| Disclaimer |
| CD4+CD25+CD127dim/– regulatory T Cell アイソレーションキット(ヒト)(#130-093-337)の後継品です。 |
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| Figure 1 |
| CD4+CD25+CD127dim/– regulatory T cells were isolated from human PBMCs by using the CD4+CD25+CD127dim/– Regulatory T Cell Isolation Kit II, an LD and two MS Columns, a MidiMACS™ Separator and a MiniMACS™ Separator. The cells were fluorescently stained with CD4-FITC, CD25-APC, and CD127-PE, or CD4-FITC, CD127-PE, and Anti-FoxP3-APC and analyzed by flow cytometry using the MACSQuant® Analyzer. Gating was performed according to CD4 expression, except for the CD25-APC vs. CD4-FITC dot plot. |
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| References |
| 1. Seddiki et al. (2006) J. Exp. Med. 203: 1693–1700. |
| 2. Liu et al. (2006) J. Exp. Med. 203: 1701–1711. |
| 3. Stockis et al. (2009) Eur. J. Immunol. 39: 3315–3322. |
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