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| CD4+CD25+CD45RA+ Regulatory T Cell アイソレーションキット |
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| Description |
| CD4+CD25+CD45RA+ Regulatory T Cell Isolation Kitは、ヒトPBMCs から、CD45RA+ 制御性T細胞を分離するために開発されました。この分離は、2ステップで行われます。 |
| Details |
Background information CD45RA+ ナイーブT細胞分画から分離されたCD4+CD25+ 制御性T細胞は、in vitroでの増殖培養に適していることが示されています。この増殖した制御性T細胞は、FoxP3+ 表現型と抑制活性とを維持していました。一方、メモリーT細胞分画から分離されたCD45RA– 制御性T細胞は、FoxP3の発現を失い、低い抑制活性しか示しませんでした1。
Detailed separation procedure 分離は2ステップで行います。まず、CD4+ T以外の細胞ととメモリーCD4+ T細胞を、ビオチン標識抗体カクテルと Anti-Biotin MicroBeadsで間接的に磁気標識します。標識した細胞をMACS® Columnにかけて除去します。次のステップでは、濃縮したCD4+CD45RA+ T 細胞画分をCD25 MicroBeads Ⅱで標識して、CD4+CD25+CD45RA+ T細胞をポジティブセレクションします。
Downstream applications このキットを用いてヒトPBMCsから分離したCD4+CD25+CD45RA+ 制御性T細胞は、表現型や機能の解析、増殖培養などに使用できます。 |
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| CD4+CD25+CD45RA+ regulatory T cells were isolated from human PBMCs by using the CD4+CD25+CD45RA+ Regulatory T Cell Isolation Kit, an LD, and two MS Columns, a MidiMACS™ Separator, and a MiniMACS™ Separator. The isolated cells were fluorescently stained with CD4, CD25, and either CD45RA or Anti-FoxP3 antibodies. Dot plots show data gated on viable lymphocytes (C) or viable CD4+ lymphocytes (A, B). |
| A |
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| B |
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| C |
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| References |
| 1. Hoffmann, P. et al. (2006) Blood 108: 4260–4267. |
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