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| Description |
| FASER Kits は、発現が弱い抗原を染色した場合、親和性の低い抗体を使用した場合、磁気標識抗体と同じエピトープに対する蛍光標識抗体で細胞染色を行なった場合など、蛍光強度が弱い際にその強度を増幅させるために使用します。さらに、蛍光強度を増強することで、フローサイトメトリー解析において、標識されている細胞と標識されてない細胞の区別が容易になります。また、磁気標識を高めるために、 Anti-FITC, Anti-PE or Anti-APC MicroBeadsと組み合わせて使用することもできます。 |
| Details |
| FASER (Fluorescence Amplification by Sequential Emplyment of Reagents) Kits - FITC, -PE, -APC は、FITC (fluorescein-isothiocyanate), PE (R-phycoerythrin) または APC (allophycocyamin) 標識抗体でラベルした細胞の蛍光強度を増強するために開発されました。蛍光強度は、2種類の試薬、蛍光色素に特異的なActivator (Reagent 1) と蛍光色素が標識されているEnhancer (Reagent 2)、 を連続して加えることにより増幅されます(図3)。蛍光強度をさらに増強させるために、一連の試薬添加を、必要回数繰り返すことも可能です。FASER Kit は、他の蛍光標識抗体による染色や MACS® MicroBeads の直接標識に対しては影響を及ぼしませんが、ビオチン化抗体との併用は避ける必要があります。どのような種のどのようなタイプの細胞でも、また生細胞でもホルムアルデヒド固定した細胞でも、このキットが使用可能です。解析はフローサイトメトリーにより行ないます。 |
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| Figure 1 |
| Human PBMCs were stained with CD19-FITC. The FITC fluorescence was increased by two rounds of amplification using the FASER Kit – FITC. The mean fluorescence intensity of the CD19+ cell population is amplified in the first round of amplification by a factor of six and in the second round by a factor of nine compared to the non-amplified staining. |
| Before use of the FASER Kit – FITC |
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| 1st Amplification round using the FASER Kit – FITC |
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| 2nd Amplification round using the FASER Kit – FITC |
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| The mean fluorescence intensity of the CD19+ cell population is amplified in the first round of amplification by a factor of 6 and in the second round by a factor of 9 compared to the non-amplified staining. |
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| Figure 2 |
PBMCs from rhesus monkey were stained with CD8-FITC and Anti-CCR7-PE. PE-fluorescence was amplified by using the FASER Kit-PE. (Data were kindly provided by Dr. Paula Acierno, Beth Israel Deaconess Medical Center, Boston, USA.) |
| Before use of the FASER Kit – PE |
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| 1st Amplification round using the FASER Kit – PE |
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| 2nd Amplification round using the FASER Kit – PE |
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| Figure 3 |
| Principle of Fluorescence Amplification by Sequential Employment of Reagents (FASER). |
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