HIV Research
HIV Isolation and Cell Culture VitalVirus HIV Isolation Kits は、臨床検体から生きて感染性のあるHIV-1ウイルス粒子を分離するために開発されました。一旦分離されたHIVは、HIV Infectivity Enhancement Reagentにより、PBMCもしくは造血系細胞株において、効果的で迅速な増殖が可能です。 VitalVirus HIV Isolation Kits Research with intact HIV-1 virions ：血漿、血清、その他の体液から、面倒な処理をすることなく、無傷の HIV-1 ウイルス粒子が分離できます。 Rapid magnetic virus isolation：μMACS VitalVirus HIV Isolation Kit で迅速な磁気ウイルス分離。 Viable and infectious HIV-1：分離した HIV-1 は感染性を維持しており、ウイルスのジェノタイピングやフェノタイピング、中和実験などに使用できます。また、初代分離も可能です。 ヒト免疫不全ウイルス (HIV-1) のエンベロープは、ウイルスによってエンコードされているタンパク質だけでなく、宿主細胞のタンパク質も含んでいます1, 2, 3。ウイルスの由来（リンパ球細胞もしくは、ミエロイド系細胞）に関わりなく、患者検体やウイルス培養液から、HIV-1 を全般的に標識し捕捉するための最も効果的な宿主細胞マーカーは、CD44であることが調べられました4。 これに基づいて、μMACS VitalVirus HIV Isolation Kit には、HIV ウイルス粒子を磁気標識するためのCD44 MicroBeads が含まれています（Fig. 1)。 この MicroBeads には、造血系細胞に存在する CD44H アイソフォームを認識するモノクローナル抗体が結合しています。 Gentle magnetic isolation：ウイルス粒子が CD44 MicroBeads で一旦磁気標識されたあとは、MACS® Column Technology により極めてマイルドな分離が可能です。得られた生きて感染性のある HIV-1 は、以下のような実験に使用できます。 ウイルスの中和実験や初代分離を含む研究のための生きた感染性 HIV-1 の濃縮 (Fig.2) 中和抗体や、その他の未知の血清中 HIV インヒビター存在下での、感染性 HIV-1 の濃縮 薬剤耐性を示す感染性 HIV-1 の濃縮 通常の検体のほか、希釈済みの検体や難しいサンプル（脳脊髄液、頚管洗浄液、母乳など）からの HIV-1 の濃縮や検出 RT-PCR やジェノタイピング5 のためのHIV-1の濃縮 Optimized PBMC stimulation protocol： 末梢血単核球細胞（PBMCs）のための 3x3 Stimulation ProtocolとµMACS™ VitalVirus HIV Isolation Kit を組合せることで、感染性HIV-1 の分離効率が格段に向上します6。 Alternative markers for indirect HIV-1 isolation：HIV-1 膜に取り込まれた他の宿主細胞表面分子を指標に、ウイルスを分離することも可能です。この場合には、ビオチン標識モノクローナル抗体と μMACS Streptavidin Kit を用います4 。 スペシャルプロトコール "Isolation of infectious HIV-1" に、ウイルスを型によって分離する研究のための、ウイルスを間接磁気分離する方法が記載されています。 HIV Infectivity Enhancement Reagent HIV Infectivity Enhancement Reagent は、ＨＩＶの細胞培養手順を簡単にし感染を促進するためのユニークなツールです。 目的細胞を感染させる前に、ウイルス上清に試薬を加え30分間インキュベーションすることで、以下の効果が期待できます： More infected target cells. 最大100倍の目的細胞が感染します Increase in integration events. 最大100倍のプロウイルスのコピーが宿主細胞ゲノムに挿入されます Accelerated kinetics of infection. 培養時間を約半分に短縮できます Increased viral yields. 細胞培養上清中に最大100倍のウイルスが回収されます HIV Infectivity Enhancement Reagent は、標的のリンパ球やマクロファージの細胞表面でHIVを繋留するために、ウイルスのエンベロープと標的細胞の両方に存在する宿主タンパク質を利用します7。 Further information Isolation of infectious HIV-1 [PDF; 105,6 KB] Isolation of infectious HIV using stimulated PBMCs [PDF; 162,3 KB] MACS&more 8-1 (2004) [PDF; 1,9 MB] VitalVirus HIV isolation flyer [PDF; 118,5 KB]		Figure 1 MACS® MicroBeads for HIV-1 isolation bind specifically to the host cell protein CD44, which is incorporated in the virus envelope4. Figure 2 HIV-1 isolation procedure

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