KIR Typing Kit
Overview KIR Typing Kit は、ヒトKIR (killer cell immunoglobulin-like receptor) 遺伝子を、genomic DNA (PCR）または mRNA 発現レベル（RT-PCR）で検出することが出来ます1-5。 KIR 遺伝子の有無を、遺伝子特異的プライマー (SSPs) によるPCR によって分析します。慎重に設計されたプライマーによって、ヒトKIR 既知遺伝子15個と 偽遺伝子2個の全てを検出することが出来ます。 Allel coverage: IPD KIR Sequence database release 2.1, March 2009 (http://www.ebi.ac.uk/ipd/) 96-well PCRプレートの各ウェルに、各プライマーやポジティブコントロールプライマー、Taq DNA Polymeraseを含む凍結乾燥された酵素ミックスが含まれています。再懸濁バッファーとテンプレート（サンプル）と混ぜてPCRプレートのウェルに分注するだけです。ゲル・ローディングバッファーも最初から含まれているので、PCR産物をすぐに電気泳動で解析できます。 Details Background information KIRsは、natural killer (NK) 細胞上に発現しており、自然免疫反応において重要な役割を担っています。また、NK細胞は移植片対宿主病 (graft versus host disease, GVHD) の抑制、骨髄細胞の生着の促進や抗腫瘍効果 (graft versus leukemia effect) に関与しています。KIRsには、種々のアイソフォームが存在します。抑制性KIRsは、標的細胞上の特定のHLA class I 分子、主としてHLA-Cと相互作用します。 全てのヒト個体が、全てのKIR遺伝子を持っているわけではなく、また、転写レベルにおいても個体間の違いが認められます。１個体内においてさえ、NK細胞のサブセットによってKIRsの発現は異なります。 Downstream applications KIR Typing Kitは、KIR遺伝子型をDNAレベルで、また、その発現をmRNAレベルで調べることが出来ます。KIR Typing Kitは、ハプロタイプ一致の幹細胞移植後のKIRプロファイリングや、感染症への感受性におけるKIR遺伝子型の役割の研究などに使用されています1-5。 Further information KIR Typing Kit – Evaluation Form [PDF; 68,8 KB] KIR typing flyer [PDF; 217,5 KB] cDNA synthesis from whole blood using the μMACS cDNA Kit and subsequent KIR typing [PDF; 91,9 KB]		Figure 1 KIR Typing Kit with ready-to-use solutions, lyophilized enzyme mix in a 96-well PCR plate, and protocol. Figure 2 KIR genotyping Agarose gel separation of PCR products obtained from genomic DNA isolated from whole blood. Lanes 1–5, 7, 9–12, 14–16, and 18–19 show positive KIR (+). Lanes 6, 8, 13, and 17 are negative for KIR (–). In addition all lanes show positive control bands (400 bp). Lane 20 shows the genomic DNA control band at 260 bp, lane 21 the positive control, and lane 22 the negative control. M: DNA marker Figure 3 mRNA expression profiling of KIR genes Agarose gel separation of PCR products obtained from mRNA-derived cDNA isolated from 5 mL whole blood. Lanes 1–4, 9–12 and 14–15 show positive KIR bands (+), whereas lanes 5–8, 13, and 16–19 are negative for KIR (–). In addition, all lanes show positive control bands (400 bp). Lane 20 shows no genomic DNA control band at 260 bp; thus, there is no genomic DNA contamination. M: DNA marker Figure 4 Gene name and allele specificity The KIR Typing Kit identifies the presence or absence of the following KIR genes and variants. (Allel coverage: IPD KIR Sequence database release 2.1, march 2009 (http://www.ebi.ac.uk/ipd/)

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