Regulatory B Cell アイソレーションキット (マウス)
Overview Regulatory B Cell アイソレーションキット（マウス）は、リンパ組織の単細胞懸濁液から、IL-10分泌regulatory B細胞を分離するために開発されました。 Details Detailed procedure Regulatory B Cellの分離は3ステップで行います。まず、non-B細胞の除去により、B細胞を濃縮します。次に、分離したB細胞をLPSやPMA, ionomycinなどで刺激し、5時間培養してIL-10の分泌を誘導します。ステップ3では、Cytokine Secretion Assayテクノロジーを用いて、IL-10を分泌しているB細胞を生きているままでポジティブセレクションします。 Downstream applications 分離したIL-10 分泌regulatory B細胞は、生きており、表現型や機能の解析に使用できます。 Columns ステップ1のディプリーション： LD Column ステップ3のポジティブセレクション： MS Columns		Regulatory B cells were isolated from mouse spleen using the Regulatory B Cell Biotin-Antibody Cocktail, Anti-Biotin MicroBeads, an LD Column, and a MidiMACS™ Separator. Cells were fluorescently stained with CD19-APC (#130-092-039) and CD4-FITC (#130-091-608) and analyzed by flow cytometry using the MACSQuant® Analyzer. Cell debris and dead cells were excluded from the analysis based on scatter signals and propidium iodide fluorescence. Pre-enriched B cells The pre-enriched regulatory B cells were incubated for 5 hr with and without LPS, PMA, and ionomycin. The isolation of IL-10-producing B cells was performed by using the principle of the Cytokine Secretion Assay. Analysis of IL-10 (PE) versus CD19-APC staining of viable lymphocytes is displayed. Before enrichment After enrichment Unstimulated control sample Before enrichment After enrichment

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